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微生物菌種藥物敏感性試驗(yàn)


微生物菌種藥物敏感性是測(cè)定微生物菌種對(duì)抗菌藥物的耐受程度,主要通過(guò)測(cè)定抗菌藥物對(duì)待測(cè)微生物的最低抑菌濃度(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)來(lái)實(shí)現(xiàn)。                  咨詢電話: 13816144967 (微信同號(hào))

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目前,微生物藥物敏感性檢測(cè)主要依據(jù)CLSI、EFSA、EUCAST、ISO、WS等國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行,檢測(cè)方法包括紙片擴(kuò)散法、肉湯/瓊脂稀釋法和Etest法。其中Etest法是綜合利用擴(kuò)散法和稀釋法的原理,預(yù)先設(shè)定連續(xù)穩(wěn)定的抗菌藥物濃度梯度進(jìn)行抗菌藥物MIC值的定量檢測(cè),實(shí)現(xiàn)制藥、食品、飼料等行業(yè)生產(chǎn)用菌株的藥物敏感性測(cè)定。

檢測(cè)項(xiàng)目:

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檢測(cè)菌種:

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檢測(cè)方法:

1.紙片法

紙片法也被稱作紙片擴(kuò)散法,是將含有定量抗菌藥物的濾紙片貼在已接種了測(cè)試菌的瓊脂表面上,紙片中的藥物在瓊脂中擴(kuò)散。在藥物擴(kuò)散的同時(shí),紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的測(cè)試菌不能生長(zhǎng),而抑菌濃度范圍外的菌株則繼續(xù)生長(zhǎng),從而在紙片的周圍形成透明的抑菌圈。

不同抗菌藥物抑菌圈的直徑因受藥物在瓊脂中的擴(kuò)散速率的影響而可能不同,抑菌圈的大小可反映測(cè)試菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度,并與該藥對(duì)測(cè)試菌的最低抑菌濃度(MIC)呈負(fù)相關(guān),即抑菌圈越大,MIC越小。咨詢電話: 13816144967 (微信同號(hào))

紙片法目前已經(jīng)被認(rèn)為是一種權(quán)威的用藥指導(dǎo)依據(jù),但由于該方法只能定性,因此紙片法通常被用來(lái)做

檢測(cè)方法:

1.紙片法

紙片法也被稱作紙片擴(kuò)散法,是將含有定量抗菌藥物的濾紙片貼在已接種了測(cè)試菌的瓊脂表面上,紙片中的藥物在瓊脂中擴(kuò)散。在藥物擴(kuò)散的同時(shí),紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的測(cè)試菌不能生長(zhǎng),而抑菌濃度范圍外的菌株則繼續(xù)生長(zhǎng),從而在紙片的周圍形成透明的抑菌圈。

不同抗菌藥物抑菌圈的直徑因受藥物在瓊脂中的擴(kuò)散速率的影響而可能不同,抑菌圈的大小可反映測(cè)試菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度,并與該藥對(duì)測(cè)試菌的最低抑菌濃度(MIC)呈負(fù)相關(guān),即抑菌圈越大,MIC越小。

紙片法目前已經(jīng)被認(rèn)為是一種權(quán)威的用藥指導(dǎo)依據(jù),但由于該方法只能定性,因此紙片法通常被用來(lái)做藥物敏感性試驗(yàn)。

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2. 牛津杯法

牛津杯法又稱杯碟法,將已滅菌的牛津杯置于試驗(yàn)平板中,往杯中注入一定量的待測(cè)樣品,培養(yǎng)一段時(shí)間后測(cè)定抑菌圈大小的一種方法。由于待測(cè)樣的抑菌效果不同,因此抑菌圈的大小也會(huì)不同。

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3. 二倍稀釋法

在抑菌實(shí)驗(yàn)中,為了評(píng)判某種藥物的抗菌功效,最低抑菌濃度(MIC)是非常重要的指標(biāo),利用二倍稀釋法可以得到MIC值。凡能抑制試驗(yàn)菌生長(zhǎng)的最高藥物稀釋度為該藥的最低抑菌濃度(MIC)。

將待檢藥物先以合適的液體培養(yǎng)基在試管或96孔板內(nèi)進(jìn)行連續(xù)稀釋,每管內(nèi)再加入一定量實(shí)驗(yàn)菌液,培養(yǎng)后,觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況,與空白對(duì)照比較,以肉眼觀察培養(yǎng)基清亮且未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)的最低濃度判定為該藥物的最低抑菌濃度。將無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物和菌種劃線接種到新的瓊脂平板上進(jìn)行培養(yǎng),進(jìn)一步確定該藥物的MIC。通常每菌重復(fù)3次,求平均值。

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